制作生物玻片标本的技能

指将细小的生物体，或生物体的一部分器官组织，用一定方法处理后，封藏于载玻片和盖玻片之间，制作成标本的技能。其制作方法有两大类。一类是切片法，是用刀片或切片机将各种组织切成薄片制成玻片标本的方法。包括徒手切片法、石蜡切片法、火棉胶切片法和冰冻切片法。一类是非切片法，是将小形生物体或较大生物体的一部分不用刀切成薄片而制成玻片标本的方法。包括整体装片法、涂片法、压片法、分离法和磨片法。玻片标本薄而透明，借助显微镜能够观察生物的细微结构和内部构造，永久性玻片标片保存十几年以上，仍能清晰地显现出各种细微结构。掌握这一技能，对细胞学、组织学、胚胎学、病理学的教学和科研有着十分重要的作用。
运用制作玻片标本技能的基本步骤和要求是：①取材。要根据需要观察和研究的内容，选取制作玻片标本的材料。②固定。将经过选择的材料立即用物理或化学的方法进行处理，以保持材料原有的特征和结构，有利保存和适于制片操作。物理方法固定可采用干燥、高热和低温骤冷等。化学方法固定是用化学试剂配制成固定液固定。③染色。利用生物染色剂使玻片标本的组织或细胞的各种不同组成成分染上不同颜色，产生不同的折光率，使各部分结构在显微镜下清晰可辨。动物组织常用苏木精、曙红染色法，植物组织常用番红、固绿染色法。④封藏。将处理好的材料，用封藏剂封藏在载玻片和盖玻片之间保存起来。常用封藏剂是树胶和甘油等。如果制作切片标本，还要增加一个切片的主要步骤，再根据需要增加脱水、透明等步骤。
运用制作玻片标本的技能必须注意：①制作玻片标本的材料要尽可能新鲜，切取材料时尽量不损伤材料，并详细记录材料名称、采集时间和地点。②材料要及时固定，以防止组织自溶和腐败。材料与固定液之比为1∶20,要在取材前根据材料的性质和制片目的选择合适的固定液。③染色前要了解染色液的性质，染色后常在同样的溶剂中洗去多余的染料。例如番红溶解在50%的酒精中，冲洗也要在50%的酒精中进行。在两重染色时，所用的染色液要有正确的先后次序。如苏木精要用在番红之前，番红要用在亮绿或固绿之前。④使用无水封藏剂，如树胶、香柏油等，标本一定要经过彻底脱水后才能封藏，封藏的标本可以保存数十年。含水封藏剂如甘油，阿拉伯胶等，标本不需脱水即可封藏，但不能长期保存。切片进行脱水时，要在35%、50%、70%、83%、95%、100%各级浓度的酒精中逐级顺序进行，脱水太快，不仅脱不干净，还会损坏组织。脱水至纯酒精时，要更换二次，每次30分钟到1小时，如需过夜，要停在70%的酒精中。