配制生物实验常用药品试剂的技能

指根据需要配制实验用不同浓度溶液、酒精和试剂的技能。运用该技能的基本要求是：①掌握溶液配制法：是指掌握配制不同浓度溶液的方法。在配制不同浓度的溶液时，溶液浓度随溶媒的容量和溶质重量而定。有百分比溶液、克分子溶液和当量溶液三种。中学生物实验中最常用的是百分比溶液。即浓度用溶质对全部溶液量的百分比表示。分稀溶液和浓溶液。稀溶液如2%醋酸洋红的配制。即将洋红2克溶于100毫升的醋酸中。一般溶液如不说明溶媒是什么，则是指水溶液。浓溶液是在100毫升的溶媒中减去溶质重量的溶媒。如30%蔗糖溶液，取蔗糖30克溶于70毫升的水中即成。②掌握酒精配制法：是指根据实验需要配制各级浓度酒精的方法。包括酒精的稀释和无水酒精的制备。稀释酒精常用95%酒精(不许用纯酒精)和蒸馏水配合而成。先将已知百分比的高度酒精倒入量筒，倒入量和将要稀释酒精的百分比相等，再将蒸馏水加到先前高度酒精的百分比数一样为止。例如将95%酒精稀释为70%时，可在量筒中倒入95%酒精70毫升，再加水至95毫升，即得70%的酒精。无水酒精一般用95%酒精加脱水剂制取。制法是：取硫酸铜磨成粉末，在坩锅中烘烤，使之脱水至粉末变为白色，将脱水的硫酸铜粉末置于95%酒精中，硫酸铜因吸水变为蓝色，继续加脱水硫酸铜，直至不再变为蓝色，此时得到的即是无水酒精，可密闭保存备用。③掌握试剂配制法：是指掌握在实验室中配制各种检验细胞化学成分试剂的方法。一是检查萄葡糖试剂(斐林氏溶液)的配制；用400毫升蒸馏水将35克硫酸铜溶解后再加水至500毫升配成A液，用400毫升蒸馏水将100克氢氧化钠和175克酒石酸钾钠溶解，再加水至500毫升配成B液，分别保存，使用时按1:1比例混合。二是检查淀粉试剂(碘液)的配制；取碘化钾2克，溶于5毫升蒸馏水中，加1克碘溶解后，加蒸馏水至300毫升，即成碘液。三是检查蛋白质试剂(米伦试剂)的配制：取汞一份溶解于一份浓硝酸中，加入二份蒸馏水即可。此液有毒，最好在使用前2—3天配好，不可久存。四是检查脂肪试剂的配制：取苏丹Ⅲ0.2克，加入100毫升纯酒精中，加热溶解成饱和酒精溶液，过滤后密闭保存。五是酸碱指示剂(酚酞试剂)的配制；取酚酞1克，溶于1000毫升60—90%酒精中，密闭保存。被检液加指示剂变为红色为碱性，不变色则为酸性。④掌握染色剂配制法：是指在中学生物实验中，能根据各种染色剂的化学性质，配制出使组织、细胞内部不同部分分别着色的染色剂的方法。一是细菌染色剂的配制，取石炭酸10克，蒸馏水190毫升配成A液，取碱性复红0.3克，95%酒精10毫升配成B液，将A液和B液混合，即成石炭酸复红。同时加蒸馏水5倍，要临时配制，以防变质。二是植物细胞壁染色剂的配制：取固绿0.1克，溶于95%酒精100毫升中，成0.1%固绿酒精溶液，可染纤维素细胞壁。用1克番红溶于100毫升蒸馏水中，成1%番红溶液，可染木质部细胞壁。三是细胞质染色剂：有四种配法。第一种是取甲基蓝1克，溶于29毫升70%酒精中，再加蒸馏水70毫升成甲基蓝溶液。第二种是取0.5克亚甲基蓝，溶于30毫升95%酒精中，再加100毫升0.01%氢氧化钾溶液成亚甲基蓝溶液。第三种是0.5%亮绿水溶液。第四种是1%伊红水溶液。四是细胞核染色剂：一种配法是取龙胆紫少许，溶于100毫升2%醋酸中，直至溶液不变而成深紫色为止。另一种配法是取苏木精1克溶于6毫升无水酒精中，成苏木精酒精溶液，取铵明矾若干溶于100毫升蒸馏水中，约1:11比例，成铵明矾蒸馏水饱和溶液，用4毫升苏木精酒精溶液，滴加在150毫升铵明矾蒸馏水饱和溶液中，搅拌混合，充分氧化，静置一周后过滤，加入甘油和甲醇各2.5毫升，密闭约1—2月，沉淀物下降后使用。该染色剂为苏木精染色剂。